|
Oxiderat DNA
Reaktiva
oxiderande ämnen som bildas i cellernas metabolism orsakar skador på
makromolekyler som t.ex. lipida skikt på cellmembran, proteiner och
nukleinsyror (DNA och RNA). En uppsättning av antioxidativa och
reparerande mekanismer finns tillgängliga för att balansera effekterna
av oxidativ stress.
Ett antal
tillstånd såsom AIDS, inflammatorisk sjukdom, diabetes, cancer och
generellt åldrande har med forskning visats påverkas av oxidativ stress
För nukleärt och mitokondriellt DNA är 8-hydroxy-2'-deoxyguanosin
(8-OHdG) en av de dominerande produkterna vid oxidation orsakad av fria
radikaler. Den används ofta som markör för oxidativ stress och
carcinogenes Studier har visat att 8-OHdG i urin är en bra biomarkör för
riskbedömning för olika former av cancer och degenerativa tillstånd.
Kitet är
avsett för direkt och kvantitativ in vitro-bestämning av
8-hydroxy-2-deoxyguanosin (8-OHdG) i urin. Applikationsbeskrivning för
serum finns tillgänglig.
Metoden är
baserad på kompetitiv ELISA -teknik. Brunnarna i plattan har coatats med
en polyklonal antikropp specifik för musantikroppar. Oxiderat DNA
(8-OHdG) i det spädda urinprovet respektive kalibrator konkurrerar om
bindningplatserna på musantikropparna mot 8-OHdG med biotinylerat
8-OHdG.
Ett konjugat av peroxidasmärkt streptavidin binds
till komplexen av biotin-antikroppar. Detta omvandlar substratet
tetrametylbenzidin (TMB) varvid en blå färg uppstår som är omvänt
proportionell mot koncentrationen av 8-OHdG i provet. Reaktionen avbryts
med tillsats av en stopplösning (H2SO4) varvid den
blå färgen övergår till gult. Absorbansen mäts vid 450 nm.
Enbart för forskningsändamål
|