25-OH-vitamin D

För klinisk kemianalysatorer
Diazyme Vitamin D-analys för klinisk kemi Analysatorer är ett trereagenssystem i flytande, stabilt format som ger tillförlitliga resultat. Metoden behöver endast 20 mikroliter prov, genomföras på mindre än 19 minuter, och har utmärkt korrelation med existerande kommersiella produkter med R2 på 0,963, en lutning på 0,912 och intercept på 5,645. Analysen har inom-serie precisionen med CV på 8,7% och en mellan-serie precision på 9,1%.

Testet baseras på principen om en-komplementering av enzym β-galaktosidas och konkurrens mellan ett enzymdonator-25-OH-vitamin D-konjugat, en anti-Vitamin D-antikropp och 25-OH-vitamin D i provet. Prover med högre 25-OH-vitamin D koncentrationer ger högre β-galaktosidasaktivitet och omvänt. Ett nitrofenyl-ß-galaktosid-derivatet (NPG) används som enzymsubstratet. Reaktionsprodukten har maximal absorbans vid 415 nm. 25-OH-vitamin D koncentrationen i ett prov är proportionell mot den uppmätta β-galaktosidasaktiviteten.

Diazyme 25-OH-vitamin D-analys är avsedd för kvantifiering av totala 25-OH-vitamin D i serum- och plasmaprover.

EIA

Diazyme innovativa nya analyskit bygger på en enzymatisk immunoanalysteknik (EIA) för att kvantifiera totalt 25-OH-vitamin D (D2 + D3) i serum- eller plasmaprover på ungefär två timmarna. Testet kan köras både manuellt och på automatiserade plattläsare. Test noggrannhet garanteras genom ett helt automatiskt extraktionssteg som eliminerar proteiner i provet som kan störa testets prestanda. Metoden är mycket exakt med Intra-precision med CV på ≤15% för prover ≥15 ng/ml. Analysen korrelerar väl med tillgängliga metoder. Vid testning med prover mellan 11.9 ng/ml och 131,5 ng/ml var korrelationskoefficienten R2 0,930 med en lutning på 0,941 och en intercept 1,4 ng/ml. Analysen är direkt spårbar till branschstandard NIST SRM 972 och har visat utmärkta prestanda med kvalitetssäkringsprogrammet DEQAS.

Analysen är baserad på konkurrens mellan en 25-OH-vitamin D-konjugat immobiliserad på en mikro och 25-OH Vitamin D i ett prov. Vitamin D extraheras (EX Reagens) från provet och blandas därefter väl med reagens R1 i mikroplattan som belagts med antikropp mot 25-OH-vitamin D. Efter en första inkubation tvättas mikroplattan och reagens R2 (HRP-märkt sekundär antikropp) tillsätts. Efter en andra inkubation och ett tvättsteg tillsätts reagens R3 (TMB-substrat). Efter ett slutligt inkubationssteg stoppas reaktionen genom tillsats av stopplösning och den utvecklad färg mäts i mikroplattan vid 450 nm (primär våglängd) varifrån en bakgrundssignal kan subtraheras efter avläsning vid sekundära våglängder (620-650 nm). Den 25-OH-vitamin D koncentrationen för ett patientprov är omvänt proportionell mot uppmätt absorbansen vid 450 nm. Hela analysförfarandet tar cirka två timmar.

Diazyme 25-OH-vitamin D-EIA Kit är avsett för kvantifiering av totalt 25-OH-vitamin D i humant serum och plasma.